שיעור 6 – קוניוגציה – סיום:

תוכן עניינים

 

 

 

שאלה – כיצד עובר הכרומוזום מן החיידק התורם למקבל? באיזה אופן?

ההשערה של וולמן וג'קוב – הכרומוזום עובר באופן ליניארי, כמו ספגטי. הניסוי – בהשראת הניסוי של הרשי, משתמשים במעבד מזון על מנת להפריד בין הקוניוגנטיים

בזמנים שונים – ניסוי זה כונה mating .interrupted

הניסוי בוצע באמצעות זני .Hfr בתחילה נבדקו שני סמנים גנטיים בלבד. לאחר מס' בדיקות בזמנים שונים, נראה שככן שעובר הזמן, כך עולה כמות הרקומביננטים. ממצא זה יכול להיות מוסבר בכך

שמעבר הכרומוזום דורש זמן מה, או שמתן יותר זמן מעלה את הכמות של מפגשים פרודקטיביים. עוד נמצא, כי בזמנים הקצרים לא הופיעו רקומביננטים בכלל, מעט ארוכים יותר החל להופיע סמן

ראשון (ובתדירות עולה ככל שעולה הזמן,) ומעט ארוכים מזאת החל להופיע גם סמן שני.

לאחר מכן, החליטו לבצע את הניסוי עם יותר סמנים גנטיים, כפי המוצג. הסלקטד מרקר שנבחר הוא

עמידות לסטרפטומיצין, והתקבלו תוצאות מדהימות! לא רק שרק לאחר זמנים מוגדרים הופיעו רקומביננטים מסוימים, אלא הסדר בו הם הופיעו הוא אותו הסדר אשר היה ידוע שבו הגנים מסודרים בכרומוזום

(מהתאחיזות שגילה לדרברג.)

 

עוד נמצא, כי אומנם שככל שעובר הזמן כך עולה אחוז הרקומביננטים, אך לאחר זמן מסוים כל תכונה מגיעה לרוויה מסוימת. מה

שמעניין הוא שתכונת העמידות לאזיד, למשל, אשר ידועה כקרובה לF- מגיעה לרוויה די גבוהה, תכונות רחוקות יותר

מגיעות לרוויה נמוכה יותר. הסיבה לכך היא שאפילו ללא הפרעת הבלנדר – ישנו סיכוי שישבר המגע בין התאים. כלומר – בהגעה לרוויה – הסיכוי למפגשים בין חיידקים

והסיכוי לשבירת הגשר ביניהם שווה.

 

 

וולמן וג'קוב מבינים שניתן באמצעות שיטה זו למפות גנים, כאשר הגנים נמדדו ביחידות של זמן (המרחק בין גן A לגן B הוא 3 דקות, למשל.) עבור ביצוע מיפוי זה, היו דרושים מס' זני .Hfr הסיבה היא שבזני Hfr הfactor- F תמיד נמצא בדיוק באותו המקום, לכן אם נשתמש באותו זן כל הזמן

תכונות הרחוקות מאוד מן הfactor- F לא תעבורנה.

לכן, היה צורך לבודד זני Hfr וזאת הושג על ידי הטכניקה הבאה: ראשית, לוקחים אוכלוסייה של חיידקים בהם ייתכן וקיימים חיידקים אשר הF- שלהם עבר אינטגרציה

עם הכרומוזום. כלומר – יתכן וישנה מושבה כלשהי אשר מכילה רק Hfr בתוך התרבית (עד כה, גודלו על מצע .)LB לאחר מכן, לכל מושבה אשר גדלה מבצעים stricking (הסיבה לכך – באם הסטריק כולו יופיע לאחר ההחתמה – ניתן לדעת בוודאות שמדובר ב.)Hfr- בשלב הבא לוקחים פלטה סלקטיבית אשר החיידקים אוקסוטרופים אליה באופן מסוים ומבצעים עליה plating replica מן הצלחת עליה נמרחו החיידקים, וכן מוסיפים חיידקים אוקסוטרופיים למטבוליטים אחרים אך ללא factor .F מדגירים ללילה ובודקים איפה התפתחה מושבה – מושבה למעשה אומרת שעברו סמנים

גנטיים, ואותה מושבה בהכרח מורכבת מזן .Hfr

דגש חשוב: המושבות שמתקבלות לאחר הסלקציה מורכבות מן הזן המקבל אשר קיבל תכונות, ולא

מזן הHfr בעצמו.

 

 

 

 

באמצעות מיפויים של זני Hfr שונים, הצליחו לפענח כי הכרומוזום של החיידקים עגול! בנוסף, מכיוון שהבחינו שהרקומביננטים אשר הופיעו בשלבים מאוחרים הפכו להיום Hfr לעומת אלו שהופיעו

מוקדם אשר היו תמיד  ,F- הסיקו כי הfactor F עובר אחרון.

 

 

 

 

הוסק כי הקוניוגציה מתרחשת

במנגנון הבא:

הגנים מובלים זה אחרי זה, כאשר הfactor- F מועבר

אחרון.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

ובנושא אחר לגמרי:

לדרברג מנסה לבדוק קוניוגציה בסלמונלה, על ידי זריעת שני זנים אוקסוטרופיים על פלטות

מינימליות. מתקבלים רקומביננטים, אך עם מאפיינים שונים מן הרקומביננטים של אי קולי:

.1 ראשית, במבחן ה,U-tube- עדיין התקבלו רקומביננטים, משמע לא חייב מגע ישיר בין

החיידקים (שולל אפשרות של קוניוגציה.)

.2 שנית, טיפול בDNase- לא מנע הופעת רקומביננטים (שולל אפשרות של טרנספורמציה.)

לתופעה קורא לדרברג ,Transduction אשר לימים תתברר כtransduction- .general זמן קצר לאחר מכן, בוצע מחקר מקיף הכולל את אי קולי ופאג' ,P1 ובו הודגם כיצד מעביר הפאג'

מקטעים באקראי ממאכסן אחד למאכסן שני.

יעילות העברת הסמנים על ידי P1 יעילה יותר מאשר קוניוגציה (תדירות של 10-6 בערך לכל סמן

המועבר,) ובכך שימשה ככלי מחקר עבור:

.1  העברת מוטציות רצויות ועמידות לאנטיביוטיקה מחיידק לחיידק.

.2  מיפוי סמנים גנטיים ברזולוציה גבוהה יותר מאשר קוניוגציה.

תגלית הטרנסדוקציה, וכן התגליות הנוגעות לפאג' ,λ הניעו את לדרברג לבחון העברת סמנים גנטיים על ידי פאג' זה (אשר כידוע, מבצע אינטגרציה לכרומוזום החיידק המארח.) הם ביצעו אינדוקציה לפרופאג' באי קולי K12 על ידי ,UV את הליזאט שהתקבל ערבבו עם חיידקים אוקסוטרופים

לתכונות שונות ורצו לראות האם קיבלו תכונות חדשות.

התוצאות לא היו מזהירות, אך כן הובחן כי התכונה לפירוק גלקטוז הועברה בתדירות של בערך .10-6

.specialized transduction כונתה זו תופעה

 

 

 

 

האבולוציה של טכנולוגיית טחינת קפה

לאורך ההיסטוריה, תהליך טחינת פולי הקפה עבר אבולוציה יוצאת דופן, שעבר מהשיטה המסורתית של שימוש במכתש ועלי למטחנות המכניות החדשניות שאנו רואים כיום.

כיצד בוחרים קבלן שיפוצים לבית?

הגעתם לרגע המיוחל ויש לכם את התקציב הדרוש, עכשיו אתם צריכים לבחור קבלן רשום שיבצע עבורכם את עבודת השיפוצים על הצד הטוב ביותר. האופציות הן רבות ועתידו של הבית שלכם מוטל בידיים של איש המקצוע, לכן בכתבה זו נתמקד בעבודתו של השיפוצניק ובכלים לבחירתו.

מספה למיטה: 7 עיצובי ספות נפתחות למיטה לנוחות מרבית

כשמדובר במקסום מקום ונוחות בסלון או בחדר האורחים, ספות נפתחות הן הפתרון המושלם. רהיטים מגוונים אלה הופכים בצורה חלקה מספה מסוגננת למיטה נעימה, ומספקים פונקציונליות ונוחות כאחד. אם אתם מחפשים לשדרג את אפשרויות הישיבה שלכם, הנה 7 עיצובי ספות נפתחות מרשימים שיחוללו מהפכה בחלל שלכם.

לקות למידה במתמטיקה

אחת הכישורים החשובים ביותר שאנו צריכים להיות בני אדם היא היכולת לחשוב בצורה יצירתית. מיומנות זו חשובה במיוחד במתמטיקה מכיוון שהיא דורשת הרבה יצירתיות ופתרון

תפקידו של בר המים בבית

בר מים הוא מכשיר שעוזר לאנשים לשתות יותר מים בפחות זמן. זוהי גם דרך מצוינת לעזור לאנשים לשמור על לחות תוך כדי תנועה. רכישת בר

כדאי לדעת
האבולוציה של טכנולוגיית טחינת קפה

לאורך ההיסטוריה, תהליך טחינת פולי הקפה עבר אבולוציה יוצאת דופן, שעבר מהשיטה המסורתית של שימוש במכתש ועלי למטחנות המכניות החדשניות שאנו רואים כיום.

כדאי לדעת
כיצד בוחרים קבלן שיפוצים לבית?

הגעתם לרגע המיוחל ויש לכם את התקציב הדרוש, עכשיו אתם צריכים לבחור קבלן רשום שיבצע עבורכם את עבודת השיפוצים על הצד הטוב ביותר. האופציות הן רבות ועתידו של הבית שלכם מוטל בידיים של איש המקצוע, לכן בכתבה זו נתמקד בעבודתו של השיפוצניק ובכלים לבחירתו.

כדאי לדעת
מספה למיטה: 7 עיצובי ספות נפתחות למיטה לנוחות מרבית

כשמדובר במקסום מקום ונוחות בסלון או בחדר האורחים, ספות נפתחות הן הפתרון המושלם. רהיטים מגוונים אלה הופכים בצורה חלקה מספה מסוגננת למיטה נעימה, ומספקים פונקציונליות ונוחות כאחד. אם אתם מחפשים לשדרג את אפשרויות הישיבה שלכם, הנה 7 עיצובי ספות נפתחות מרשימים שיחוללו מהפכה בחלל שלכם.

כדאי לדעת
לקות למידה במתמטיקה

אחת הכישורים החשובים ביותר שאנו צריכים להיות בני אדם היא היכולת לחשוב בצורה יצירתית. מיומנות זו חשובה במיוחד במתמטיקה מכיוון שהיא דורשת הרבה יצירתיות ופתרון

תפקידו של בר המים בבית

בר מים הוא מכשיר שעוזר לאנשים לשתות יותר מים בפחות זמן. זוהי גם דרך מצוינת לעזור לאנשים לשמור על לחות תוך כדי תנועה. רכישת בר